檢測流程

1、寄樣

2、初檢

3、報價

4、簽訂保密協(xié)議

5、開始實驗

6、結(jié)束實驗

7、后期服務(wù)

以上是對于細胞增值實驗的相關(guān)介紹，如有其它檢測需求可以咨詢實驗室工程師，為您一對一服務(wù)。

第三方檢測報告用途

1、銷售使用

2、研發(fā)使用

3、工業(yè)問題診斷

4、科研論文/市場抽檢數(shù)據(jù)使用

5、投標競標

6、項目工程等

我們的檢測優(yōu)勢

1、健明迪檢測是雙高新技術(shù)企業(yè)，檢測資質(zhì)齊全，實驗室儀器先進，科研團隊強大。

2、多家實驗室分支，總部位于北京，在上海、廣州、江蘇、濟南、四川等都有分支實驗室。

3、初檢樣品，初檢之后根據(jù)客戶檢測需求以及實驗復(fù)雜程度進行報價。

4、檢測周期短，檢測費用低，實驗方案齊全。

5、檢測報告認可，支持掃碼查詢真?zhèn)危瑱z測報告認可度高。

二、方法和步驟

實驗一：細胞增殖分析

1、制備細胞懸液：細胞計數(shù)。

2、接種到96孔板中：根據(jù)合適的鋪板細胞數(shù)(約1-2×104)，每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復(fù)。

3、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：細胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。

4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議將槍頭浸入培養(yǎng)液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻。或者直接配置含10%CCK8的培養(yǎng)基(現(xiàn)用現(xiàn)配)，以換液的形式加入。

5、培養(yǎng)0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續(xù)培養(yǎng)，以確認最佳條件(建議預(yù)實驗先摸清楚時間點)。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間(5-6小時)。

6、測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。

實驗二：細胞毒性分析

1、制備細胞懸液：細胞計數(shù)

2、接種到96孔板中：根據(jù)合適的鋪板細胞數(shù)(約≥5×104)，每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復(fù)。

3、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：細胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。

4、加入不同濃度的毒性物質(zhì)。

5、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：加入毒性物質(zhì)的培養(yǎng)時間，要看毒性物質(zhì)的性質(zhì)和細胞的敏感性，一般要根據(jù)細胞周期來決定，起碼要一代以上的時間(例如：6、12、24、48、60、72小時)。

6、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議將槍頭浸入培養(yǎng)液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻。

7、培養(yǎng)0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續(xù)培養(yǎng)，以確認最佳條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間(5-6小時)。

8、測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。

一、所需設(shè)備及儀器

1. 10ul，100-200ul及多通道移液器

2. 酶標儀(帶有450nm濾光片)

3. 96孔培養(yǎng)板

4. 二氧化碳培養(yǎng)箱