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Vwf-eGFP基因定點(diǎn)敲入小鼠模型

更新時(shí)間：2025-11-26 來源：健明迪檢測(cè)

健明迪檢測(cè)提供的Vwf-eGFP基因定點(diǎn)敲入小鼠模型，討論與結(jié)論動(dòng)物癥狀觀察：表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個(gè)月后死亡，具有CMA，CNAS認(rèn)證資質(zhì)。

討論與結(jié)論

動(dòng)物癥狀觀察：

表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個(gè)月后死亡。

生物安全性

實(shí)驗(yàn)中涉及動(dòng)物的操作程序已經(jīng)得到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用與管理委員會(huì)的批準(zhǔn)(ILAS-GC-2012-001)。

評(píng)價(jià)驗(yàn)證

Vwf基因編碼一種與止血有關(guān)的糖蛋白。Vwf基因的突變導(dǎo)致血管性血友病(VWD)，一種遺傳性出血性疾病。VWF作為循環(huán)凝血因子VIII（FVIII）的載體蛋白也有重要作用，減少了血漿中FVIII的清除。

制備方法

采用Cas9進(jìn)行基因定點(diǎn)敲入。

研究背景

Vwf基因編碼一種與止血有關(guān)的糖蛋白。編碼的前原蛋白在組裝成大的多聚體復(fù)合物后進(jìn)行蛋白水解。這些復(fù)合物在血小板粘附到血管損傷部位和運(yùn)輸各種蛋白質(zhì)在血液中發(fā)揮作用。Vwf基因的突變導(dǎo)致血管性血友病(VWD)，一種遺傳性出血性疾病。VWF作為循環(huán)凝血因子VIII（FVIII）的載體蛋白也有重要作用，減少了血漿中FVIII的清除；VWF復(fù)合物通過與OPG13、OPG14和RANKL的相互作用從而抑制破骨細(xì)胞形成；FVIII.VWF復(fù)合物被認(rèn)為可作為一種抗吸收因子存在于正常生理過程及血腫過程中。eGFP是GFP的突變系，該蛋白對(duì)野生型GFP（wtGFP）發(fā)生了雙氨基酸取代，Leu(亮氨酸)取代Phe64(苯丙氨酸)，Thr(蘇氨酸)取代Ser65(絲氨酸)；基于等量溶解蛋白的光譜分析，由于Em(消光系數(shù))的增加和色基構(gòu)型的率，EGFP在488nm處激發(fā)后燈熒光強(qiáng)度為wtGFP的35倍、發(fā)光效率更高。