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HIV-1 YU2腹腔感染NOG小鼠模型

更新時間：2025-11-26 來源：健明迪檢測

健明迪檢測提供的HIV-1 YU2腹腔感染NOG小鼠模型，討論與結論 1.該模型制備比較成熟，國內外都有此模型，構建和評價指標一致，所以該模型應用廣泛，具有統一的操作規程，具有CMA，CNAS認證資質。

討論與結論

1.該模型制備比較成熟，國內外都有此模型，構建和評價指標一致，所以該模型應用廣泛，具有統一的操作規程。

2. 該模型制備的關鍵：1）小鼠必須是重度免疫缺陷的，而且飼養環境必須潔凈；2）HIV操作需要生物安全。

3.此模型具有完善的人的免疫系統，HIV感染后，具有艾滋病病人相似的臨床癥狀，所以具有很高的比較醫學應用價值。

生物安全性

所有感染動物必須在ABSL-3室中進行。

評價驗證

1、1. SIVmac251靜脈感染恒河猴外周血病毒載量結果

8只SIVmac251靜脈感染恒河猴均在感染后7d檢出病毒載量陽性，之后迅速上升，在感染后14d達到高峰，峰值在107至108copies/mL之間，隨后迅速下降（圖1）。SIVmac251靜脈感染后42d到140d感染猴的血漿載量比較穩定，1、2、3、4、9、11六只感染猴血漿病毒載量維持在105至107copies/mL之間；10號猴血漿病毒載量下降至105copies/mL以下；12號猴血漿病毒載量一直維持在較高水平，即107copies/mL以上。

圖1 SIVmac251靜脈感染中國恒河猴外周血病毒載量結果

Fig.1 Theviremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

1、 2. SIVmac251靜脈感染恒河猴CD4+/CD8+比值結果

8只感染猴CD4+/CD8+的比例在SIVmac251靜脈感染后持續下降，均于感染后14d出現倒置。2、4、10、11、12猴在感染后期一直維持在1以下的水平，其中，2、10、11三只猴維持在0.5上下波動。1、3、9三只感染猴在SIVmac251靜脈感染后期CD4+/CD8+比值有些許反彈，在1.0上下波動。（圖2）。

圖2 SIVmac251靜脈感染中國恒河猴外周血CD4+/CD8+T淋巴細胞比值

Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

3.SIVmac251靜脈感染恒河猴CD4+ T細胞絕對數

8只感染猴CD4+細胞絕對數在SIVmac251靜脈感染后迅速下降，隨后發生回彈，在感染后56d下降至最低，之后維持在穩定水平（圖3）。12號猴的CD4+細胞絕對數在感染后231天下降至50個/μL，出現艾滋病癥狀，繼而死亡。4號猴的CD4+細胞絕對數在感染后259天下降至100個/μL以下；3號猴的CD4+細胞絕對數一直在800-1000個/μL上下浮動。

圖3 SIVmac251靜脈感染中國恒河猴外周血CD4+T淋巴細胞絕對數

Fig.3 The CD4+T cell counts (per l blood) in Chinese-origin rhesus macaques infectedintravenously with SIVmac251

制備方法

1、實驗用病毒：感染毒株為SIVmac251中國恒河猴細胞適應株，中國恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度為5×103 TCID50/mL。

2、感染動物：選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實驗前體檢無異常，必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉錄D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴細胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相關的4種基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）篩查結果為陰性。所有感染動物必須在ABSL-3室中進行。

3、感染方法：將1 mL含有50 TCID50 的SIVmac251病毒經后肢靜脈接種恒河猴。

4、 SIVmac251靜脈感染猴樣品采集和指標測定：在感染前和感染后7、14、21、28、42、56、84、112、140、168、196、231、259、287天采集EDTA抗凝血4mL，分別測定血常規、血漿病毒載量、CD4+/CD8+、CD4+細胞絕對數。

5、 SIVmac251靜脈感染猴血漿病毒載量的測定：提取EDTA抗凝血漿中病毒RNA，使用SYBR Green I 實時熒光定量RT-PCR方法測定血漿病毒載量。

6、 SIVmac251靜脈感染猴外周血CD4+/CD8+比值及絕對數測定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標記EDTA抗凝全血淋巴細胞，流式細胞儀測定CD4+/CD8+比值，并根據血常規結果，計算出CD4+T細胞絕對數。