在全民關(guān)注食品平安的當(dāng)下，食品微生物檢測作為食品平安檢測不可或缺的一環(huán)，也成為食品平安檢測的重中之重。

經(jīng)過食品微生物檢驗(yàn)，可以判別食品加工環(huán)境及食品衛(wèi)生狀況，可以對食品被細(xì)菌污染的水平作出正確的評價(jià)，那么在食品微生物檢測中，大家經(jīng)常會(huì)遇到哪些效果？又該如何處置？一同來看一下！

| 01.菌落總數(shù)的測定，只做一個(gè)稀釋度行嗎？

| 02.同一個(gè)稀釋度，菌落總數(shù)一個(gè)在計(jì)數(shù)范圍，一個(gè)不在計(jì)數(shù)范圍，怎樣計(jì)？

| 03.涂抹樣品的檢測，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)和報(bào)告？

| 04.培育基配置有哪些留意事項(xiàng)？

| 05.剩余的培育基再次運(yùn)用能否重新滅菌？

| 06.霉菌計(jì)數(shù)如何保證結(jié)果準(zhǔn)確？

| 07.無菌水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液三者有什么區(qū)別？

| 08.培育皿接種后為什么要倒置？

01 菌落總數(shù)的測定,只做一個(gè)稀釋度行嗎？

不可行。在GB 4789.2中要求每個(gè)樣品選擇2-3個(gè)適宜的稀釋度停止檢測。即使一個(gè)樣品曾經(jīng)基本可以確定了菌落數(shù)了，也建議多檢測一個(gè)稀釋度，多一個(gè)稀釋度也會(huì)對檢測結(jié)果停止驗(yàn)證，只測一個(gè)稀釋度會(huì)存在風(fēng)險(xiǎn)。

另外假設(shè)嚴(yán)厲依照國標(biāo)要求，這樣的檢測也是不契合要求的，某些要求嚴(yán)厲的外審部門能夠會(huì)對此開具不契合項(xiàng)。因此在檢測中還是應(yīng)該嚴(yán)厲依照國度規(guī)范執(zhí)行。

02 同一個(gè)稀釋度，菌落總數(shù)一個(gè)在計(jì)數(shù)范圍，一個(gè)不在計(jì)數(shù)范圍，怎樣計(jì)？

同一稀釋度的兩個(gè)平板，一個(gè)在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，一個(gè)不在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，則以在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)的平板的菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)作為報(bào)告結(jié)果。

舉例來說明，某樣品檢測結(jié)果：10-1兩平板菌落數(shù)區(qū)分為320、288，10-2稀釋度兩平板菌落數(shù)為27、23，則樣品的檢測結(jié)果應(yīng)選取288停止報(bào)告，報(bào)告結(jié)果為2.9*103CFU/g。

03 涂抹樣品的檢測，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)和報(bào)告？

涂抹樣品檢測的計(jì)數(shù)是比擬復(fù)雜的，給大家舉例子來說明！

假設(shè)你涂抹的樣品面積是25cm2，采樣的涂抹液是10mL，而檢測只吸取1mL樣液，即檢測的是原樣品的10-1的稀釋度，即平板計(jì)數(shù)菌落*10為樣品中的菌落數(shù)。結(jié)果報(bào)告就是菌落數(shù)/取樣面積。例如，取樣面積是25cm2，檢測平皿上計(jì)數(shù)為13，則結(jié)果報(bào)告應(yīng)該為13*10CFU/25cm2。

04 培育基配置有哪些留意事項(xiàng)？

(1) 滅菌溫度要嚴(yán)厲控制，依照要求滅菌，尤其含糖量較高的培育基溫度不應(yīng)太高，過高會(huì)招致糖分焦化，影響質(zhì)量；

(2) 瓊脂培育基不能重復(fù)溶化。重復(fù)溶化會(huì)破壞培育基中的營養(yǎng)成分；

(3) 培育基不能重復(fù)滅菌，重復(fù)滅菌也會(huì)招致營養(yǎng)成分的破壞；

(4) 含瓊脂的培育基滅菌后，要搖勻。

05 剩余的培育基再次運(yùn)用能否重新滅菌？

這分為兩種狀況。*種狀況，曾經(jīng)凝結(jié)后重新消融后運(yùn)用的，依據(jù)GB 4789.28-2013中明白規(guī)則，未用完的培育基不可重新凝結(jié)留待下次運(yùn)用。遇到這種狀況，培育基只能棄置，并且國標(biāo)要求，棄置也需求契合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)則。

第二種狀況，初次滅菌后未用完的培育基，可待培育基凝結(jié)后再停止保管。但保管條件需避光枯燥，保證其成分不會(huì)發(fā)作改動(dòng)。再次運(yùn)用時(shí)依照要求停止消融即可，不可二次滅菌。初次滅菌已開封但未運(yùn)用完的培育基，不建議再次運(yùn)用，畢竟存在風(fēng)險(xiǎn)。但若是液體培育基，就不存在消融的進(jìn)程，初次滅菌后未運(yùn)用終了可依照國標(biāo)要求保管，運(yùn)用時(shí)需求保證培育基成分不發(fā)作改動(dòng)，不可停止二次滅菌。若無法保證培育基能否契合要求，應(yīng)當(dāng)棄置。

06 霉菌計(jì)數(shù)如何保證結(jié)果準(zhǔn)確？

霉菌菌落由孢子和菌絲組成，相當(dāng)分散，在直徑9cm的平皿里，菌落數(shù)稍多就相互交叉堆疊，影響計(jì)數(shù)，但數(shù)量太少又會(huì)發(fā)生較大的誤差，因此選擇適當(dāng)?shù)南♂尪扔?jì)數(shù)是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。

我們對這方面作了一些觀察研討，首先是將實(shí)驗(yàn)菌株的斜面培育物制成含有約106個(gè)/ml的孢子懸液，并用血球計(jì)數(shù)器在顯微鏡下準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，然后將孢子懸液作10-1~10-6倍稀釋，吸取不同稀釋度的稀釋液接種于PDA，25℃培育5天后計(jì)數(shù)。30種罕見霉菌的兩種不同計(jì)數(shù)方法所得結(jié)果比擬顯示，大局部菌株每平板含有10~50個(gè)菌落的稀釋度時(shí)的計(jì)數(shù)與顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果*接近；有近一半的菌株，每個(gè)平板含50~100個(gè)菌落已較難計(jì)數(shù)，而大局部菌株，超越100個(gè)/平皿或小于10個(gè)/平皿的計(jì)數(shù)結(jié)果就與顯微計(jì)數(shù)結(jié)果存在較大差異，因此，應(yīng)盡量選擇10~50個(gè)/平皿的稀釋度停止霉菌計(jì)數(shù)。

而對上述提及的菌絲很豐厚、菌落特別分散的毛霉、根霉、犁頭霉等菌株，則應(yīng)在更少的范圍內(nèi)計(jì)數(shù)(30個(gè)/平皿以內(nèi))。為控制霉菌的生長速度和菌落的生長范圍，可在培育基中添加大批抗生素，如氯霉素(50~100mg/L)，金霉素(20~100mg/L)，慶大霉(50mg/L)，土霉素(100mg/L)等。

07 無菌水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液三者有什么區(qū)別？

無菌水就是復(fù)雜的檢測水停止滅菌；生理鹽水是0.85%的NaCl水溶液；磷酸鹽緩沖液普通是選擇磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉依照一定比例配制的緩沖液。

在食品微生物檢測中，三者*主要的區(qū)別在于對菌的維護(hù)作用。無菌水不存在對菌的維護(hù)，由于浸透壓的作用，還能夠形成菌吸水脹裂死亡；生理鹽水的浸透壓基本與菌的細(xì)胞液相當(dāng)，會(huì)對菌有一定的維護(hù)。磷酸鹽緩沖液除了在浸透壓方面對菌有維護(hù)作用，對pH也有一定的緩沖作用，因此對菌有更好的維護(hù)。國標(biāo)要求，微生物檢測需求用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液稀釋。但也有局部研討標(biāo)明，檢測樣品若NaCl含量超越10%也可以運(yùn)用無菌水稀釋，但并未被國度規(guī)范認(rèn)可。

08 培育皿接種后為什么要倒置？

接種后，將平板倒置，既可防止冷凝水滴到培育基上，防止雜菌污染；又利于菌種的生長、繁衍和計(jì)數(shù)。

1.利于菌種的生長和繁衍

培育條件為必需通風(fēng)時(shí)，倒置的平板可以增加培育基外表的空氣活動(dòng)，減慢培育基中水分蒸發(fā)的速度，堅(jiān)持瓊脂等固體培育基中的水分，充沛的維持瓊脂等凝結(jié)劑的彈性，延伸培育基出現(xiàn)干裂的時(shí)間。所以，倒置培育有利于菌種的繁衍和生活。假設(shè)將平板正放，大約幾天時(shí)間培育基就會(huì)出現(xiàn)水分流失和開裂的狀況。可見，防止培育進(jìn)程中水分流失是十分重要的。

2.防止培育進(jìn)程中雜菌污染平板

倒置培育時(shí)，由于平板內(nèi)的空氣不易活動(dòng)，能盡能夠的增加外來雜菌的侵染，防止雜菌污染培育基和培育物。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)觀察，發(fā)現(xiàn)假設(shè)平板正放，平板的周邊容易長出雜菌菌落。

3.有利于營養(yǎng)物質(zhì)富集，方便觀察計(jì)數(shù)

平板倒置停止微生物培育時(shí)，受重力的影響，一方面培育基中的營養(yǎng)物質(zhì)主要會(huì)富集在培育基外表及外表以下的次層，有利于微生物生長；另一方面培育基外表熟長的菌落相對不會(huì)太快分散，觀察時(shí)有利于區(qū)分菌落特征。

其它

1）由于如今普通拿平板的操作均為：小蓋子朝向手心，五指張開抓住平板，大拇指推進(jìn)平板的大蓋子停止操作，所以倒置平板有利于操作；

2）其他人翻開培育箱的時(shí)分一不小心就把平皿蓋給翻開了，倒置培育的時(shí)分不容易翻開。

以上就是食品微生物檢測小編關(guān)于食品微生物檢測罕見效果的分享，希望能在大家為此困惑的時(shí)分有所協(xié)助。你們關(guān)于食品微生物檢測還有哪些閱歷或難點(diǎn)呢？歡迎大家在后臺(tái)留言共同交流討論。

微生物檢驗(yàn)技術(shù)

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